切片相关问题解答

发布时间:2016-04-15    浏览次数:1828

4、用手动石蜡切片机进行切片,发现出现跳刀的现象。
答:锁紧刀架和样本头的各个部位,进行测试切片,跳刀现象会好转,进行设备维护,彻底清洁刀架,跳刀现象消失,证明切片机的日常维护非常重要。
Q:冰冻切片机切片时容易片子起皱?
A:1.检查刀片及样本头是否夹紧。2.检查切片角度是否合适。3.查看切片温度是否适合,不同的组织对应的温度不同。

Q:切片时片子上有刀痕?
A:1.组织是否钙化。2.刀口上是否粘有杂物如毛笔须之类的。3.组织块中是否有异物。
Q: 细胞浆着色不佳

  (1)如果全片内胞浆都淡染,则需要延长染色时间或更换新液。

  (2)如果胞浆不分色,均为浅红色。制片在固定前干燥或制片被有大量球菌样细菌影响胞浆染色。此情况可以适当增加染色时间能够部分纠正不分色状况。

  (3)胞浆染成灰色或紫色,是由于苏木素染色时间过长或盐酸分化不佳。经过褪色后重新苏木素可以纠正。

  (4)由于标本的不同,同样配方的EA染液可造成偏蓝、偏绿和偏红,对不同的标本应该使用不同的EA染液。一般认为,EA36和EA50用于妇科标本,而EA65或改良EA用于非妇科标本。

  (5)胞浆不分色的另一重要原因是由于EA染液的PH值不恰当所致。如染色为红色,可以加少许磷钨酸溶液纠正;如染色均为蓝色或绿色,可以加少许饱和碳酸锂溶液纠正。对于改良EA染液,每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳;染液使用更持久。
 
Q:组织切片时易发生组织破碎不整现象?
A:组织中有钙化点,将蜡块切面放入20%的盐酸液中几分钟再进行切片。

Q:组织过软,不易切片
A:将过软的组织块退回到蜡液中继续浸蜡,或将组织块退回重新进行脱水透明浸蜡。


Q:切片卷起或圆筒状
A:可能导致此现象的原因:1、切片太厚 2、石蜡过硬 3、刀的倾角太大。
   处理方法:1、掌握好切片厚度,3-5um;2、用温水浸泡蜡块;3、调整刀架角度

Q:切片有褶皱
A:刀和蜡块没有固定好,重新检查固定刀和蜡块。

Q:切片困难
A:按常规制片时间及程序处理标本,切片困难多见于含脂肪丰富的组织,脱水、脱脂不干净,影响浸蜡是该类组织切片困难的主要因素。   解决方法:95%乙醇有固定、脱水、溶解脂肪和类脂的作用,应延长含脂肪丰富组织在95%乙醇中的脱水时间。

Q:切片染色不均
A:1、组织取材固定不当  2、组织脱水时间过短  3、切片厚薄不均或有横纹  4、分化不当、分化剂浓度过大、分化后没有迅速入水,可造成染色过淡、过深或染色不均等现象。

1 石蜡切片去除褶皱
除皱折无裂隙法 配制20%~40%的酒精溶液。只需将切好的石蜡膜沾上低浓度酒精,然后将石蜡膜漂浮于42℃左右的温水上,这样切片马上自然展平,避免了传统方法用镊子 撑折造成的人为裂隙,制成的片子效果极好。
Q:石蜡切片机切片厚薄不均?
A:①考虑组织块问题,是否包埋时,组织盒里蜡的注入量偏少,使得切片时组织不稳定,发生轻微震颤导致切片厚薄不均。②考虑切片机刀片是否安装紧,各导轨、刀架锁杆是否锁紧。③考虑机器是否有内部磨损,需要维护保养切片机。

Q:切片时蜡片过软,无法正常连成平整切片?
A:①考虑包埋石蜡熔点是否过低,可在包埋蜡里适量添加蜂蜡。②考虑切片时蜡块是否完全冻透。

Q:组织制片过程中,发现片子在显微镜下有红色小区域污染?
A:①考虑在染色中低浓度酒精至无水的过程中,无水的时间是否太短或是无水的步骤太少(建议无水两缸以上)。②考虑染色玻片的质量问题,有些玻片在材质上有嗜酸性,空白玻片经过染色过程,玻片上也会有红色。注意区分。

Q:组织制片过程中发现有一块块区域不着色,制片发乌,颜色不够鲜亮?
A:①考虑二甲苯脱蜡是否彻底。②二甲苯到无水酒精这一步,二甲苯是否彻底洗干净。无水酒精的液面不得低于二甲苯液面。③染色结束后脱水透明步骤是否彻底。


Q:制片中中发现飞片现象十分严重?
A:①考虑组织固定是否及时充分。②烤片时间是否足够。③分化液浓度是否过高。

Q:切片染色发现边缘有焦的感觉,切片有裂隙,切片干,脆?
A:①考虑脱水步骤中无水酒精时间是否过长。②无水酒精浓度不是100%的无水酒精。

Q:组织偏软,无法正常切下完整片子?
A:①脱水不彻底,适当延长无水和二甲苯时间。②检查脱水试剂的成分。

 

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